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上海滬崢生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
禽肺病毒(APV) 試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:上海滬崢
  • 產(chǎn)地:國內(nèi)
  • 型號:50T/盒
  • 貨號:HZW6539
  • 價(jià)格: ¥2680/盒
  • 發(fā)布日期: 2021-02-19
  • 更新日期: 2025-09-18
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國內(nèi)
品牌 上海滬崢
貨號 HZW6539
用途 僅用科研
包裝規(guī)格 50T/盒
是否進(jìn)口

【產(chǎn)品名稱】

商品名稱:禽肺病毒(APV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)


【包裝規(guī)格】50 份/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測的血清或血漿、疑似污染 REV 的活病

毒疫苗等標(biāo)本中禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒 RNA,適用于禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病

毒感染的輔助診斷。其檢測結(jié)果僅供參考。

禽肺病毒(APV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)【檢驗(yàn)原理】

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標(biāo)本采集】

水樣便取 0.5~1mL;疑似污染的食物取 1g

【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1 樣本前處理

水樣便 13000rpm 離心 2min,去盡上清;疑似污染的食物用手術(shù)剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中;疑似污染的水直接取 100μL

1.2 DNA 提取

1) DNA 的提取也可以采用DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

本試劑盒用一對禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性熒光

探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)

增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。

【試劑組成】

名 稱 規(guī) 格

酶液 50μl×1 管

REV 反應(yīng)液 1.0ml×1 管

REV 陽性質(zhì)控品 50μl ×1 管

陰性質(zhì)控品 250μl ×1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

禽肺病毒(APV)檢測試劑盒(熒光-PCR法) 結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。

1.2 結(jié)果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線;

可疑:檢測通道 35 值≤38,建議重復(fù)檢測,如果檢測通道仍為 35 值≤38, 且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。


2. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:Ct 值>38 或無 Ct 值;

陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

3. 檢測方法的局限性

? 樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

? 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;

? 陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果;

? 病原體在流行過程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

? 不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

? 試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定 量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果;

? 本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

【注意事項(xiàng)】

? 所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;

? 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完全混勻并短暫離心;

? 反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

? 反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

? 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;

? 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通 則》進(jìn)行處理。







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