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| 產地 | 國內 |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZT2138 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規格 | 50T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進口 |
差異脲原體PCR檢測試劑盒
差異脲原體（Ureaplasma Diversum）1969年*被分離出來，最初被定義為非致病性物種，但是最近已證明它會對牛組織細胞和器官造成損傷。 差異脲原體常見于牛的生殖道，與這些動物的主要生殖器官疾病有關。受感染的母牛可能出現不孕、胎盤炎、胎牛肺泡炎和流產或弱小犢牛出生的現象，而在公牛中它可能導致精子活力低下、精囊炎和附睪炎。盡管如此，差異脲原體和牛生殖異常之間的關系仍然存在爭議，主要是因為在正常繁殖的動物中也有高比例的陽性檢出率。差異脲原體是一種兼性細胞內微生物，既可以在細胞內檢測到，也可以粘附在細胞表面。它對牛精子的侵入與精子活力低有關，表明它可能導致這些細胞的死亡。它也能誘導實驗感染小鼠的子宮產生TNF-α，表明它可能顯著改變子宮微環境的穩態。差異脲原體對這些細胞和組織發揮毒力和致病性的分子機制大多是未知的。
體外培養法和PCR法均可用于檢測差異脲原體。體外培養法是經典的檢測方法，但耗時較長，而使用PCR法則有靈敏度高和特異性強的優點，且檢測時間短，僅需幾個小時即可獲得結果。
差異脲原體PCR檢測試劑盒選取了16S rRNA基因的一段序列進行PCR鑒定，引物經BLAST驗證為特異性靶向差異脲原體，與其他生物的基因組無交叉反應。使用本試劑盒檢測了5種牛寄生性支原體，僅有差異脲原體產生特異性擴增條帶；而對168個生殖異常牛的陰道拭子檢測的結果顯示，有64個呈陽性，靈敏度高于體外培養法。可見本試劑盒具有物種特異性，可用于差異脲原體的鑒定和檢測。
差異脲原體PCR檢測試劑盒【使用方法】
1. 樣品處理（樣本處理區）
1.1 樣本前處理
組織：取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿，勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中；
液體標本：取適量標本13000rpm離心2min，棄上清。
1.2 DNA提取
1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液，100℃恒溫處理10分鐘，13,000 rpm離心5分鐘，取上清液轉移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2. 試劑配制（試劑準備區）
根據代檢測樣本總數，設所需要的PCR反應管管數為N（N=樣本數+1
管陰性對照+1管陽性對照），體系配制如下表：
試劑
WSSV 反應液
酶液
用量（樣本數為N）
20μl
1μl
3. 加樣（樣本處理區）
將步驟1提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取4μl，加入相應的
反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。
4. PCR擴增（核酸擴增區）
4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內；
5. 結果分析判定
差異脲原體PCR檢測試劑盒結果分析條件設定
設置基線（baseline）：一般情況下，對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle，對PE5700設為3-15cycle,對MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調整。
設置閾值（threshold）:以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線（無規則的噪音線）的zui高點。
結果判斷
陽性：檢測樣本Ct值小于等于35.0，且曲線有明顯的指數增長期；
可疑：檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復一次實驗，如果Ct值仍小于40.0，且曲線有明顯的指數增長期，為陽性，否則為陰性；
陰性：檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。.
